รับชุดสรุปผลการทดลองในแปลงพืชของ ABI ฟรี
รวมผลการทดลองในแปลงจริง 12 รายการ มีข้อมูลบันทึกครบ แสดงผลผลิต ราก และคุณภาพที่เพิ่มขึ้น แยกตามชนิดพืช กรอกอีเมลแล้วรับได้ทันที
ขอบคุณ เราได้รับข้อมูลของท่านแล้ว ดาวน์โหลดชุดข้อมูลได้ที่ปุ่มด้านล่าง
ดาวน์โหลดชุดข้อมูล (PDF)CFU คือ หน่วยนับจุลินทรีย์ที่ยังมีชีวิตและขยายพันธุ์ได้ในผลิตภัณฑ์ ย่อมาจาก colony forming units โดย 1 CFU คือเซลล์ที่มีชีวิต 1 เซลล์หรือกลุ่มเซลล์ 1 กลุ่มที่เติบโตเป็นโคโลนีที่นับได้บนจานเพาะเชื้อในห้องแล็บ ดังนั้น CFU จึงนับเฉพาะเชื้อที่ยังมีชีวิตเท่านั้น หัวเชื้อจุลินทรีย์ระบุค่าเป็น CFU ต่อกรัม ผลิตภัณฑ์การเกษตรโดยทั่วไปอยู่ที่ประมาณ 1,000 ล้าน ถึง 500,000 ล้าน CFU ต่อกรัม ขึ้นกับชนิดเชื้อ และตัวเลขที่สำคัญจริงคือปริมาณเชื้อที่ใส่ลงแปลงต่อเอเคอร์
ผลิตภัณฑ์จุลินทรีย์ทุกตัวที่ขายในภาคเกษตรจะมีตัวเลขบนฉลาก เช่น "100,000 ล้าน CFU ต่อกรัม" และตัวเลขนี้เองที่กำหนดว่าสินค้ามีมูลค่าแค่ไหน CFU คือ หน่วยมาตรฐานสำหรับนับจุลินทรีย์ที่ยังมีชีวิต ย่อมาจาก colony forming units ตัวเลขนี้คือสิ่งที่แยกถุงที่มีเชื้อมีชีวิตพร้อมทำงาน ออกจากถุงที่มีแค่ผงวัสดุพากับฉลากสวย ๆ ตัวแทนจำหน่าย ร้านค้าปัจจัยการเกษตร และเกษตรกรที่ใช้หัวเชื้อจุลินทรีย์ จึงควรรู้ว่าตัวเลขนี้ได้มาอย่างไร ค่าที่สมเหตุสมผลควรเป็นเท่าไร และค่าบนฉลากกับค่าที่ส่งถึงแปลงจริงเริ่มห่างกันตรงไหน
บทความนี้อธิบายความหมายของ CFU วิธีการในห้องแล็บที่อยู่เบื้องหลังตัวเลข ช่วงค่า CFU ที่สมเหตุสมผลแยกตามชนิดเชื้อ และคำถามที่ช่วยแยกค่าที่ตรวจสอบได้ออกจากตัวเลขทางการตลาด เขียนขึ้นสำหรับผู้ที่ซื้อ สต็อก และขายต่อหัวเชื้อจุลินทรีย์ โดยอ้างอิงแนวปฏิบัติการควบคุมคุณภาพ (QC) ที่ ABI ทำกับทุกล็อตการผลิตในโรงงานที่รัฐวิสคอนซิน
สรุปสั้น: CFU คืออะไร และทำไมต้องดูให้เป็น
- CFU นับเฉพาะจุลินทรีย์ที่ยังมีชีวิตและขยายพันธุ์ได้ เซลล์ที่ตายแล้วไม่สร้างโคโลนีและไม่ถูกนับ
- 1 CFU ไม่ได้เท่ากับ 1 เซลล์เสมอไป เซลล์ที่จับกลุ่ม ต่อกันเป็นสาย หรือสปอร์ที่เกาะกันแล้วเติบโตเป็นโคโลนีเดียว จะถูกนับเป็น 1 ครั้ง นี่คือเหตุผลหนึ่งที่ค่า CFU ต่างจากค่าที่นับเซลล์ด้วยกล้องจุลทรรศน์
- ค่าที่สมเหตุสมผลในผลิตภัณฑ์สำเร็จรูปอยู่ที่ประมาณ 1,000 ล้าน ถึง 500,000 ล้าน CFU ต่อกรัม ขึ้นกับชนิดเชื้อ เชื้อกลุ่ม Bacillus ที่สร้างสปอร์ได้อยู่ช่วงบนสุด ส่วนเชื้อที่ไม่สร้างสปอร์จะต่ำกว่า
- ผลิตภัณฑ์ไมคอร์ไรซาเป็นข้อยกเว้น AMF หมักเลี้ยงในถังไม่ได้ จึงวัดเป็นจำนวนหน่วยขยายพันธุ์ (propagules) ต่อกรัม ไม่ใช่ CFU
- ตัวเลขที่สำคัญคือ CFU ที่ใส่ลงแปลงต่อเอเคอร์ ซึ่งได้จาก CFU ต่อกรัม ณ วันที่ใช้จริง (ไม่ใช่ ณ วันที่ผลิต) คูณด้วยจำนวนกรัมที่ใช้ และก่อนเทียบต้องแปลงทุกค่าที่อ้างให้เป็นหน่วยเดียวกันของผลิตภัณฑ์สำเร็จรูป
- ทุกล็อตของ ABI ผ่านการตรวจยืนยันสายพันธุ์ด้วย PCR ก่อนปล่อยสินค้า และส่งพร้อมใบรับรองผลการวิเคราะห์ (CoA) ที่ระบุค่า CFU ต่อกรัม
สารบัญ
- CFU คืออะไร และ CFU ย่อมาจากอะไร?
- วิธีวัดและคำนวณค่า CFU
- ค่า CFU เท่าไรจึงสมเหตุสมผล?
- ค่าบนฉลาก กับ ค่าที่ส่งถึงแปลงจริง
- วิธีเปรียบเทียบผลิตภัณฑ์ด้วยค่า CFU
- CFU ในสูตรผสมหลายสายพันธุ์
1. CFU คืออะไร และ CFU ย่อมาจากอะไร?
CFU ย่อมาจาก colony forming units แปลตรงตัวคือ "หน่วยที่สร้างโคโลนีได้" เป็นหน่วยมาตรฐานที่นักจุลชีววิทยาใช้นับจุลินทรีย์ที่ยังมีชีวิตและขยายพันธุ์ได้ หลักการที่มาของชื่อนั้นเรียบง่าย คือนำตัวอย่างที่เจือจางแล้วไปเกลี่ยบนจานอาหารเลี้ยงเชื้อ บ่มไว้ เซลล์ที่มีชีวิตทุกเซลล์หรือกลุ่มเซลล์ที่มีชีวิตทุกกลุ่มจะเติบโตเป็นโคโลนีที่มองเห็นได้ นับจำนวนโคโลนี ปรับด้วยค่าการเจือจาง ก็จะได้ค่า CFU ของตัวอย่างตั้งต้น [1][2]
CFU นับเฉพาะเชื้อที่มีชีวิต เซลล์ที่ตายแล้วอยู่บนจานเฉย ๆ ไม่เกิดอะไรขึ้น CFU จึงเป็นตัววัดที่ตรงไปตรงมาสำหรับสินค้าที่มีคุณค่าอยู่ที่เชื้อมีชีวิตทั้งหมด และเป็นเหตุผลที่ฉลากหัวเชื้อใช้ CFU แทนการบอกมวลเซลล์รวมหรือปริมาณโปรตีน ผลิตภัณฑ์หนึ่งอาจมีวัตถุจากจุลินทรีย์อยู่เต็มถุง แต่ยังนับ CFU ได้เกือบเป็นศูนย์ ถ้าเชื้อไม่รอดจากกระบวนการผลิตหรือการเก็บรักษา
หน่วยที่สร้างโคโลนีได้ 1 หน่วยก็ไม่ได้หมายถึงเซลล์เดียวเสมอ แบคทีเรียที่เติบโตเป็นสายหรือเป็นกลุ่ม และสปอร์ที่เกาะติดกัน จะตกลงบนจานเป็นหน่วยเดียวและเติบโตเป็นโคโลนีเดียว ค่าที่นับได้จึงเป็นจำนวนหน่วยที่สามารถตั้งต้นประชากรเชื้อได้ ซึ่งเป็นตัวเลขที่มีความหมายทางการเกษตร แต่ก็ทำให้ค่า CFU อ่านได้ต่ำกว่าการนับเซลล์โดยตรงด้วยกล้องจุลทรรศน์ในตัวอย่างเดียวกันเสมอ [2] ไม่มีตัวเลขไหนผิด ทั้งสองวัดคนละอย่าง และ CFU คือตัวเลขที่บอกได้ว่าจะเกิดอะไรขึ้นในดินของท่าน
CFU/g และ CFU/ml คืออะไร?
หน่วยเดียวกันนี้พบได้บนฉลากโพรไบโอติก โยเกิร์ต และรายงานคุณภาพน้ำ เพราะเป็นหน่วยกลางที่งานจุลชีววิทยาใช้นับเชื้อมีชีวิต ในภาคเกษตร ผลิตภัณฑ์ชนิดผงจะระบุเป็น CFU ต่อกรัม (CFU/g) และชนิดน้ำจะระบุเป็น CFU ต่อมิลลิลิตร (CFU/ml)
2. วิธีวัดและคำนวณค่า CFU
วิธีมาตรฐานคือการเจือจางแบบต่อเนื่อง (serial dilution) แล้วนับโคโลนีบนจานเพาะเชื้อ (plate count) วิธีนี้แทบไม่เปลี่ยนมาเป็นศตวรรษ และยังเป็นวิธีอ้างอิงในคู่มือของหน่วยงานกำกับดูแล เช่น Bacteriological Analytical Manual ของ FDA สหรัฐฯ [1]
ผลิตภัณฑ์เข้มข้นนับตรง ๆ ไม่ได้ เพราะ 1 กรัมที่มีเชื้อหลายพันล้านตัวจะทำให้จานเต็มไปด้วยโคโลนีที่ซ้อนทับกัน ห้องแล็บจึงเจือจางตัวอย่างทีละ 10 เท่าซ้ำหลายรอบ นำปริมาตรที่ทราบค่าจากแต่ละระดับการเจือจางไปเกลี่ยบนจาน บ่ม แล้วเลือกจานที่มีจำนวนโคโลนีอยู่ในช่วงที่นับได้ ซึ่งตามธรรมเนียมอยู่ที่ประมาณ 25 ถึง 250 โคโลนีต่อจาน [1] จากนั้นคำนวณดังนี้
สูตรคำนวณ CFU ต่อกรัม
CFU ต่อกรัม = (จำนวนโคโลนีที่นับได้ x ค่าการเจือจาง) / ปริมาตรที่เกลี่ยบนจาน
ในทางปฏิบัติเป็นแบบนี้ ห้องแล็บเจือจางผลิตภัณฑ์ 1 กรัมให้เจือจางลง 1,000 ล้านเท่าเป็นขั้น ๆ เกลี่ยปริมาตรที่วัดไว้บนจาน แล้วบ่ม สมมติว่าขึ้นมา 150 โคโลนี แต่ละโคโลนีจะเทียบเท่ากับ 1,000 ล้าน CFU ในผลิตภัณฑ์ตั้งต้น 1 กรัม ล็อตนี้จึงมีค่าประมาณ 150,000 ล้าน CFU ต่อกรัม หัวใจของวิธีนี้คือการคูณกลับ เจือจางจนนับโคโลนีได้ แล้วคูณย้อนกลับขึ้นไป
ข้อสังเกตในการอ่านค่า ฉลากและใบรับรองผลการวิเคราะห์มักเขียนตัวเลขเหล่านี้เป็นสัญกรณ์วิทยาศาสตร์ 1 x 1011 CFU ต่อกรัม เท่ากับ 100,000 ล้าน ส่วน 5 x 1010 เท่ากับ 50,000 ล้าน เป็นตัวเลขเดียวกันที่เขียนได้ 2 แบบ
แม้ทำอย่างระมัดระวัง การนับแบบเจือจางต่อเนื่องก็ยังมีความคลาดเคลื่อนทางสถิติประมาณบวกลบ 10 ถึง 30 เปอร์เซ็นต์ ซึ่งเป็นที่รู้กันอยู่แล้ว หน่วยงานกำกับและผู้ผลิตจึงนับหลายจานแล้วรายงานค่าเฉลี่ย [2] และนี่คือเหตุผลที่ล็อตที่ตรวจได้ 105,000 ล้าน CFU ต่อกรัม เทียบกับสเปก 100,000 ล้าน ถือว่าไม่ต่างกัน การไล่หาความแม่นยำระดับตัวเลข 2 หลักในค่า CFU ที่อ้างบนฉลากจึงเป็นการเข้าใจวิธีวัดผิดไป
สำหรับเชื้อที่สร้างสปอร์ ห้องแล็บมักนับหลังผ่านขั้นตอนให้ความร้อน (heat shock) ที่ฆ่าเซลล์ที่กำลังเจริญและเหลือไว้เฉพาะสปอร์ ผลที่ได้คือจำนวนสปอร์ ซึ่งเป็นตัวเลขที่เกี่ยวกับอายุการเก็บรักษามากที่สุด ABI ตรวจค่า CFU ทุกล็อตการผลิต และยืนยันสายพันธุ์ด้วย PCR ในห้องแล็บของบริษัทเองก่อนปล่อยสินค้า ทุกล็อตส่งพร้อมใบรับรองผลการวิเคราะห์ที่ระบุค่า CFU ต่อกรัมที่ตรวจยืนยันแล้ว
3. ค่า CFU เท่าไรจึงสมเหตุสมผล?
ธรรมชาติของเชื้อ กระบวนการหมัก และขั้นตอนการทำแห้ง เป็นตัวกำหนดค่า CFU ต่อกรัมในผลิตภัณฑ์สำเร็จรูป ช่วงค่าที่ทำได้จึงต่างกันมากตามชนิดเชื้อ ตัวเลขที่อยู่นอกช่วงเหล่านี้ไปมากควรตั้งคำถาม
| ชนิดเชื้อ | ช่วงค่าทั่วไปในผลิตภัณฑ์สำเร็จรูป | เหตุผล |
|---|---|---|
| แบคทีเรียที่สร้างสปอร์ (เชื้อกลุ่ม Bacillus) | 10,000 ล้าน ถึง 500,000 ล้าน CFU/g | สปอร์ทนการทำแห้งและการเก็บรักษาได้แทบไม่เสียหาย ค่าสูงสุดในอุตสาหกรรม |
| แบคทีเรียที่ไม่สร้างสปอร์ (เชื้อกลุ่ม Pseudomonas) | 1,000 ล้าน ถึง 100,000 ล้าน CFU/g | เซลล์ที่กำลังเจริญสูญเสียความมีชีวิตระหว่างทำแห้ง ต้องใช้สูตรที่พิถีพิถัน |
| เชื้อรา (Trichoderma, Penicillium, Beauveria) | 1,000 ล้าน ถึง 50,000 ล้าน CFU/g | นับจากโคนิเดีย (สปอร์) ทนทานแต่มีขนาดใหญ่กว่าสปอร์แบคทีเรีย |
| ราไมคอร์ไรซา (AMF) | ไม่วัดเป็น CFU | เป็นเชื้อที่ต้องอาศัยร่วมกับพืชเท่านั้น เลี้ยงบนรากพืชที่มีชีวิต วัดเป็นจำนวนหน่วยขยายพันธุ์ต่อกรัม ตั้งแต่หลักสิบถึงหลักพัน ขึ้นกับความเข้มข้น |
อ่านตารางนี้ในทางปฏิบัติได้ 3 ข้อ
เชื้อที่สร้างสปอร์ครองตลาดด้วยเหตุผลที่ชัดเจน Bacillus subtilis, Bacillus megaterium และเชื้อในกลุ่มใกล้เคียง รักษาค่า CFU ได้ตลอดการทำแห้ง การขนส่งทางเรือข้ามมหาสมุทร และการเก็บในโกดังที่ไม่มีห้องเย็นตลอดหนึ่งฤดู จึงเป็นแกนหลักของรายการสินค้าเชิงพาณิชย์ส่วนใหญ่ ผลิตภัณฑ์ผงสายพันธุ์เดี่ยวของ ABI มีค่าตั้งแต่ประมาณ 10,000 ล้าน ถึง 500,000 ล้าน CFU ต่อกรัม ขึ้นกับชนิดเชื้อและสเปกที่ลูกค้ากำหนด
ค่าที่ต่ำกว่าไม่ใช่ข้อบกพร่อง ถ้าธรรมชาติของเชื้ออธิบายได้ Pseudomonas fluorescens ไม่สร้างสปอร์พักตัว ผลิตภัณฑ์ Pseudomonas ทั้งอุตสาหกรรมจึงมักมีค่าสูงสุดต่ำกว่าค่าสูงสุดของ Bacillus และต้องเก็บรักษาดีกว่า ของ ABI ทำได้ถึง 100,000 ล้าน CFU ต่อกรัม ซึ่งเป็นค่าที่สูงสำหรับเชื้อที่ไม่สร้างสปอร์ และถ้าวัดกันที่จำนวนเชื้อที่ส่งถึงบริเวณรากพืช ผลิตภัณฑ์ Pseudomonas ก็ดีเยี่ยมได้ Trichoderma harzianum (ไตรโคเดอร์มา ฮาร์เซียนัม) และเชื้อราชนิดอื่นนับจากโคนิเดีย และมีค่าอยู่ตรงกลาง
ส่วนไมคอร์ไรซาใช้หน่วยคนละแบบไปเลย AMF หมักเลี้ยงในถังไม่ได้ ผลิตภัณฑ์เอนโดไมคอร์ไรซา จึงเลี้ยงบนรากพืชอาศัยที่มีชีวิต และวัดเป็นจำนวนหน่วยขยายพันธุ์ต่อกรัม สินค้าในตลาดมีตั้งแต่หลักสิบหน่วยต่อกรัมในชนิดเม็ดที่เจือจาง ไปจนถึงหลักพันในชนิดผงเข้มข้น Endo Mycorrhizae ของ ABI กำหนดสเปกไว้ที่ 6,000 หน่วยต่อกรัม และแม้ผลิตภัณฑ์ที่เข้มข้นที่สุดก็ยังอยู่ในหลักหมื่น ไม่เคยถึงหลักพันล้าน ฉลากไมคอร์ไรซาที่อวดตัวเลขหลักพันล้านกำลังวัดอย่างอื่นอยู่ อ่านวิธีดูฉลากเหล่านี้ได้ในคู่มือราไมคอร์ไรซาในการเกษตร
4. ค่าบนฉลาก กับ ค่าที่ส่งถึงแปลงจริง
ช่องว่างระหว่างค่า CFU บนฉลากกับค่า CFU ที่อยู่ในถุงจริง ณ วันที่ใช้ คือประเด็นคุณภาพที่สำคัญที่สุดของอุตสาหกรรมนี้ การสำรวจอิสระของหัวเชื้อเชิงพาณิชย์พบซ้ำแล้วซ้ำเล่าว่ามีผลิตภัณฑ์ที่ตรวจได้ต่ำกว่าค่าที่อ้างบนฉลาก หรือมีเชื้อปนเปื้อน ปัญหานี้มีการบันทึกไว้ในหลายตลาดมาหลายปี [3][4] สาเหตุเป็นเรื่องธรรมดา ได้แก่ ค่าที่ระบุเป็นค่า ณ วันผลิตแทนที่จะเป็นค่า ณ วันขาย การลดลงของเชื้อระหว่างเก็บในห่วงโซ่การกระจายสินค้า สูตรที่ไม่เคยเสถียรตั้งแต่ต้น และกรณีที่แย่ที่สุดคือตัวเลขที่ไม่เคยถูกวัดเลย
จำนวนเชื้อมีชีวิตลดลงตามเวลาในผลิตภัณฑ์ที่มีชีวิตทุกชนิด คำถามคือลดเร็วแค่ไหน ผลิตภัณฑ์ผงที่เป็นสปอร์ เก็บในที่เย็นและแห้ง รักษาค่าตามสเปกได้ 1 ถึง 2 ปีหรือนานกว่านั้นที่อุณหภูมิห้อง และการแช่เย็นยืดเวลาออกไปได้อีก มักถึง 2 หรือ 3 ปีหรือนานกว่า ส่วนผลิตภัณฑ์น้ำที่ไม่ใช่สปอร์ซึ่งเก็บในโกดังร้อน อาจสูญเสียเชื้อส่วนใหญ่ภายในไม่กี่เดือน ค่า CFU ที่มีความหมายจึงต้องเป็นค่าที่รับประกันตลอดอายุการเก็บรักษาที่ระบุ ไม่ใช่วัดครั้งเดียวที่หน้าประตูโรงงาน
ดูหน่วยที่อยู่ใต้ตัวเลขด้วย มีรูปแบบฉลาก 2 แบบที่ควรดูซ้ำ บางผลิตภัณฑ์ชนิดน้ำระบุค่า CFU ต่อมิลลิลิตรที่ดูน่าประทับใจ แล้วไปบอกไว้อีกที่หนึ่งว่าสารออกฤทธิ์มีเพียง 1 เปอร์เซ็นต์ของทั้งภาชนะ ถ้าค่าที่ระบุเป็นค่าของหัวเชื้อเข้มข้นแทนที่จะเป็นค่าของผลิตภัณฑ์สำเร็จรูป ตัวเลขจริงในถังผสมจะต่ำลงถึงร้อยเท่า 8,300 ล้าน CFU ต่อมิลลิลิตรของส่วนออกฤทธิ์ 1 เปอร์เซ็นต์ เท่ากับประมาณ 83 ล้านต่อมิลลิลิตรของสิ่งที่ท่านเทออกมาจริง อีกแบบคือระบุค่าต่อปอนด์แทนต่อกรัม 6 ล้านล้าน CFU ต่อปอนด์ฟังดูมหาศาล แต่คิดออกมาได้ประมาณ 13,000 ล้านต่อกรัม ซึ่งเป็นค่าธรรมดา ก่อนเปรียบเทียบอะไร ให้แปลงทุกค่าที่อ้างเป็น CFU ต่อกรัม หรือต่อมิลลิลิตรของผลิตภัณฑ์สำเร็จรูป ฉลากที่ทำให้แปลงหน่วยได้ยากก็กำลังบอกอะไรบางอย่างกับท่านเช่นกัน
ผู้ซื้อตัดความสับสนส่วนใหญ่ได้ด้วยคำถาม 4 ข้อ
- ค่า CFU ระบุแยกรายล็อตในใบรับรองผลการวิเคราะห์ หรือพิมพ์ไว้บนฉลากเท่านั้น?
- ค่ารับประกัน ณ จุดขายหรือตลอดอายุการเก็บรักษา หรือรับประกันเฉพาะ ณ วันผลิต?
- สภาพการเก็บรักษาและวันหมดอายุเป็นอย่างไร และห่วงโซ่การกระจายสินค้าทำได้ตามนั้นจริงหรือไม่?
- มีการยืนยันสายพันธุ์รายล็อตหรือไม่ เพื่อให้แน่ใจว่าค่าที่นับเป็นของเชื้อตามฉลาก?
ผู้ผลิตที่ทำ QC จริงจะตอบทั้ง 4 ข้อเป็นลายลักษณ์อักษรได้โดยไม่ติดขัด ABI ยืนยันสายพันธุ์ด้วย PCR ในห้องแล็บของบริษัทก่อนปล่อยสินค้า ระบุค่า CFU ต่อกรัมที่ตรวจยืนยันแล้วใน CoA ของทุกล็อต เก็บบันทึกการผลิตรายล็อตไว้เพื่อการตรวจสอบย้อนกลับ และเผยแพร่สภาพการเก็บรักษาและอายุการเก็บรักษาไว้ในเอกสารข้อมูลทางเทคนิคของแต่ละผลิตภัณฑ์
5. วิธีเปรียบเทียบผลิตภัณฑ์ด้วยค่า CFU
ดูค่า CFU ต่อกรัมอย่างเดียวจัดอันดับผลิตภัณฑ์ไม่ได้ สิ่งที่ใช้จัดอันดับได้จริงคือต้นทุนในการใส่เชื้อให้ได้ปริมาณที่ได้ผลลงไป 1 เอเคอร์ โดยเทียบกันเป็น 3 ขั้นตอน
ขั้นแรก คำนวณปริมาณเชื้อที่ใส่จริง CFU ต่อกรัม คูณ จำนวนกรัมที่ใช้ต่อเอเคอร์ ได้เป็น CFU ต่อเอเคอร์ ซึ่งเป็นตัวเลขที่งานวิจัยภาคสนามเชื่อมโยงกับผลลัพธ์ ผลิตภัณฑ์ 100,000 ล้าน CFU ต่อกรัม ใช้ 100 กรัมต่อเอเคอร์ ให้เชื้อ 10 ล้านล้าน CFU ต่อเอเคอร์ ส่วนผลิตภัณฑ์ 10,000 ล้าน ใช้ 1,000 กรัม ให้ปริมาณเชื้อเท่ากัน แต่หนักและเทอะทะกว่า
ขั้นที่สอง คำนวณต้นทุนต่อปริมาณเชื้อที่ใส่จริง หารต้นทุนต่อเอเคอร์ด้วย CFU ต่อเอเคอร์ แล้วมักพบว่าสินค้าพรีเมียมถูกกว่าถุงราคาถูก เพราะความเข้มข้นช่วยลดค่าขนส่ง ค่าเก็บรักษา และค่าจัดการ ไปพร้อมกับราคาต่อหน่วยเชื้อ สำหรับตัวแทนจำหน่าย ผงเข้มข้นสูงยังขนส่งและเก็บในคลังได้ถูกกว่าเมื่อคิดต่อหน่วยสินค้าที่ขาย
ขั้นที่สาม พิจารณาสิ่งที่ CFU ไม่ได้วัด การเลือกชนิดเชื้อให้ตรงงานสำคัญกว่าตัวเลขใด ๆ ซึ่งคู่มือเลือกสายพันธุ์ตามหน้าที่ช่วยได้ ความเสถียรของสูตรเป็นตัวตัดสินว่าค่า CFU จะอยู่รอดถึงวันใช้หรือไม่ และการยืนยันสายพันธุ์เป็นตัวตัดสินว่า CFU ที่ได้เป็นของเชื้อที่ท่านคิดว่ากำลังซื้ออยู่หรือไม่ เชื้อสายพันธุ์ที่ถูกต้อง 1,000 ล้าน CFU ดีกว่าสายพันธุ์ที่ผิด 1 ล้านล้าน CFU
6. CFU ในสูตรผสมหลายสายพันธุ์
สูตรผสมยังมีเรื่องต้องคิดเลขบนฉลากเพิ่มอีกหนึ่งเรื่อง ผลิตภัณฑ์ผสมสำเร็จรูปทุกกรัมถูกแบ่งกันระหว่างส่วนผสมทั้งหมด ค่า CFU ของแต่ละสายพันธุ์จึงเป็นเพียงส่วนหนึ่งของค่ารวม และยิ่งเพิ่มสายพันธุ์ ก็ยิ่งแบ่งกรัมนั้นให้เล็กลง ฉลากที่ระบุ 10 สายพันธุ์พร้อมค่ารวมตัวเดียวที่ดูน่าประทับใจ แทบไม่บอกอะไรเลยเกี่ยวกับปริมาณของเชื้อตัวใดตัวหนึ่ง
ให้ขอค่ารับประกันรายสายพันธุ์แทนค่ารวม และระวังสูตรผสมที่ใช้สายพันธุ์ราคาถูกเป็นตัวเติม มาแบกตัวเลขหลักบนฉลาก ขณะที่สายพันธุ์ที่ทำหน้าที่จริงและมีราคาแพงถูกใส่ไว้ในระดับน้อยนิด นี่คือรูปแบบเดียวกับการเพิ่มตัวเลขบนฉลากไมคอร์ไรซา แต่เป็นฝั่งแบคทีเรีย การออกแบบสูตรผสมเป็นศาสตร์จริงที่ต้องถ่วงดุลระหว่างจำนวนสายพันธุ์กับปริมาณเชื้อที่ใส่จริงต่อสายพันธุ์ อธิบายจากมุมผู้ซื้อไว้ในคู่มือการผลิตสูตรจุลินทรีย์ผสมตามสั่ง และเป็นเหตุผลที่ ABI กำหนดสูตรผสมตามสั่งจากหน้าที่เป้าหมายและค่า CFU รายสายพันธุ์ ผ่านเครื่องมือออกแบบสูตรผสม แทนการใช้ค่ารวมเป็นตัวนำ
สำหรับผู้ซื้อ: ABI ผลิตหัวเชื้อจุลินทรีย์สายพันธุ์เดี่ยวและสูตรผสมตามสั่งตามสเปก CFU ที่ตรวจยืนยันได้ในรัฐวิสคอนซิน ทุกล็อตผ่านการยืนยันสายพันธุ์ด้วย PCR และปล่อยสินค้าพร้อมใบรับรองผลการวิเคราะห์ที่ระบุค่า CFU ต่อกรัม ขอสเปกและราคา หรือ ออกแบบสูตรผสม
เอกสารอ้างอิง
คำถามที่พบบ่อย
CFU คืออะไร ย่อมาจากอะไร?
CFU คือ colony forming units หรือหน่วยก่อโคโลนี เป็นหน่วยมาตรฐานที่ใช้วัดจำนวนจุลินทรีย์ที่ยังมีชีวิตและขยายพันธุ์ได้ในตัวอย่าง เซลล์ที่มีชีวิตแต่ละเซลล์หรือกลุ่มเซลล์แต่ละกลุ่มจะเจริญเป็นโคโลนีที่นับได้หนึ่งโคโลนีบนจานเพาะเชื้อในห้องแล็บ เซลล์ที่ตายแล้วไม่เกิดโคโลนี ค่า CFU จึงนับเฉพาะจุลินทรีย์ที่ทำงานในดินของท่านได้จริงเท่านั้น
1 CFU เท่ากับแบคทีเรีย 1 เซลล์ไหม?
ไม่เท่ากันเสียทีเดียว เซลล์ที่เจริญต่อกันเป็นสายหรือเกาะกันเป็นก้อน รวมถึงสปอร์ที่ติดกัน จะเกิดเป็นโคโลนีเดียวบนจานเพาะเชื้อและนับเป็น 1 CFU ค่า CFU จึงมักต่ำกว่าการนับเซลล์โดยตรงด้วยกล้องจุลทรรศน์จากตัวอย่างเดียวกันอยู่บ้าง แต่ในทางการเกษตร CFU คือตัวเลขที่สำคัญกว่า เพราะนับเฉพาะเชื้อที่ยังเพิ่มจำนวนเป็นประชากรจุลินทรีย์ที่มีชีวิตได้จริง
ค่า CFU คำนวณอย่างไร?
ค่า CFU คำนวณจากการเจือจางแบบลำดับขั้น (serial dilution) ร่วมกับการนับโคโลนีบนจานเพาะเชื้อ ห้องแล็บจะเจือจางตัวอย่างทีละ 10 เท่า นำปริมาตรที่ทราบค่าแน่นอนไปเกลี่ยบนจานอาหารเลี้ยงเชื้อ และหลังบ่มเชื้อแล้วจะนับเฉพาะจานที่มีโคโลนีอยู่ในช่วง 25 ถึง 250 โคโลนี สูตรคือ CFU เท่ากับจำนวนโคโลนีที่นับได้คูณด้วยค่าการเจือจาง หารด้วยปริมาตรที่เพาะลงจาน แล้วแปลงกลับเป็นค่าต่อกรัมหรือต่อมิลลิลิตรของผลิตภัณฑ์ตั้งต้น
ค่า CFU ของหัวเชื้อจุลินทรีย์เท่าไหร่ถึงจะดี?
ขึ้นอยู่กับชนิดของจุลินทรีย์ ผลิตภัณฑ์ Bacillus ที่สร้างสปอร์ได้มีค่าได้จริงตั้งแต่ 10,000 ล้าน ถึง 500,000 ล้าน CFU ต่อกรัม ส่วนเชื้อที่ไม่สร้างสปอร์อย่าง Pseudomonas มีค่าต่ำกว่าโดยธรรมชาติ และผลิตภัณฑ์เชื้อราจะอยู่ระหว่างสองกลุ่มนี้ สิ่งที่สำคัญคือปริมาณเชื้อที่ลงถึงแปลงจริง ซึ่งเท่ากับ CFU ต่อกรัมคูณด้วยอัตราการใช้ โดยค่านี้ควรรับประกัน ณ จุดขาย ไม่ใช่แค่ ณ วันที่ผลิต
ทำไมผลิตภัณฑ์ไมคอร์ไรซาไม่ระบุค่า CFU?
เชื้อราอาร์บัสคูลาร์ไมคอร์ไรซา (AMF) เป็นเชื้อที่ต้องอยู่ร่วมกับพืชอาศัยเท่านั้น (obligate symbiont) จึงขยายได้บนรากพืชอาศัยที่มีชีวิตเท่านั้น ไม่สามารถหมักเลี้ยงในถังแบบแบคทีเรียได้ ผลิตภัณฑ์กลุ่มนี้จึงวัดเป็นหน่วยขยายพันธุ์ (propagules) ต่อกรัม ซึ่งนับรวมสปอร์ ชิ้นส่วนรากที่มีเชื้อ และชิ้นส่วนเส้นใย ค่าสเปกของ AMF มีตั้งแต่หลักสิบ propagules ต่อกรัมในผลิตภัณฑ์ชนิดเม็ดแบบเจือจาง ไปจนถึงหลักพันในผลิตภัณฑ์ผงเข้มข้น ส่วนตัวเลขหลักพันล้านนั้นเป็นค่าที่ใช้กับแบคทีเรีย
ค่า CFU ลดลงระหว่างเก็บรักษาไหม?
ลดลงแน่นอน ผลิตภัณฑ์จุลินทรีย์มีชีวิตทุกชนิดมีค่า CFU ลดลงตามเวลา ประเด็นอยู่ที่ว่าลดลงเร็วแค่ไหน ผลิตภัณฑ์ผงที่เป็นสปอร์ซึ่งเก็บในที่เย็นและแห้งรักษาค่า CFU ได้ 1 ถึง 2 ปีหรือนานกว่า และการเก็บในตู้เย็นช่วยยืดออกไปได้ถึง 2 ถึง 3 ปีหรือนานกว่า ส่วนผลิตภัณฑ์ชนิดน้ำที่ไม่ใช่สปอร์หากเก็บในที่ร้อนอาจสูญเสียเชื้อส่วนใหญ่ภายในไม่กี่เดือน ควรเลือกซื้อจากค่าที่รับประกัน ณ จุดขายหรือตลอดอายุการเก็บรักษา และเก็บตามเงื่อนไขในเอกสารข้อมูลทางเทคนิค
ค่า CFU ยิ่งสูงยิ่งดีไหม?
ไม่เสมอไป การเลือกชนิดจุลินทรีย์ให้ตรงกับหน้าที่ที่ต้องการสำคัญกว่าตัวเลขใด ๆ และสิ่งที่ควรเปรียบเทียบจริง ๆ คือต้นทุนต่อจำนวน CFU ที่ลงถึงแปลงในแต่ละไร่ ไม่ใช่ดูแค่ CFU ต่อกรัมอย่างเดียว ผลิตภัณฑ์ที่ค่า CFU ต่ำกว่าแต่เป็นเชื้อที่ถูกชนิดและใช้ในอัตราที่ถูกต้อง ให้ผลดีกว่าผลิตภัณฑ์ค่าสูงที่เป็นเชื้อผิดชนิด
ตรวจสอบค่า CFU ที่ผู้ขายกล่าวอ้างได้อย่างไร?
ขอใบรับรองผลการวิเคราะห์ (CoA) ของล็อตนั้นที่ระบุค่า CFU ต่อกรัม สอบถามว่ายืนยันสายพันธุ์อย่างไร ตรวจสอบว่าค่า CFU รับประกัน ณ จุดขายหรือแค่ ณ วันที่ผลิต และดูว่ามีการเก็บบันทึกการผลิตของแต่ละล็อตไว้เพื่อตรวจสอบย้อนกลับหรือไม่ นอกจากนี้ ท่านยังส่งตัวอย่างไปให้ห้องแล็บจุลชีววิทยาอิสระแห่งใดก็ได้ตรวจนับเชื้อบนจานเพาะได้ด้วย ผู้ผลิตที่มีระบบควบคุมคุณภาพ (QC) จริงจะให้ข้อมูลทั้งหมดนี้ได้โดยไม่ติดขัด
CFU กับ AFU ต่างกันอย่างไร?
AFU ย่อมาจาก active fluorescent units เป็นการนับด้วยวิธีโฟลว์ไซโตเมทรี (flow cytometry) โดยย้อมสีเซลล์แล้วนับด้วยเลเซอร์ ซึ่งรวมเซลล์ที่มีชีวิตแต่ไม่เจริญบนจานเพาะเชื้อไว้ด้วย ค่า AFU จึงสูงกว่า CFU เมื่อวัดจากตัวอย่างเดียวกัน และใช้แทนกันไม่ได้ AFU พบส่วนใหญ่บนฉลากโพรไบโอติก ส่วนหัวเชื้อจุลินทรีย์ทางการเกษตรระบุเป็น CFU จึงควรเปรียบเทียบผลิตภัณฑ์โดยใช้หน่วยเดียวกัน
รับค่า CFU ที่ตรวจยืนยันทุกล็อต
ทุกล็อตของ ABI ผ่านการตรวจยืนยันสายพันธุ์ และส่งพร้อมใบรับรองผลการวิเคราะห์ (CoA) ที่ระบุค่า CFU ต่อกรัม ติดต่อเราเพื่อขอสเปกและราคา




